技術(shù)文章
Technical articles1975年，Kohler和Milstein發(fā)現(xiàn)將小鼠骨髓瘤細(xì)胞和綿羊紅細(xì)胞免疫的小鼠脾細(xì)胞進(jìn)行融合，形成的雜交細(xì)胞既可產(chǎn)生抗體，又可無限增殖，從而創(chuàng)立了單克隆抗體雜交瘤技術(shù)。這一技術(shù)上的突破不僅為醫(yī)學(xué)與生物學(xué)基礎(chǔ)研究開創(chuàng)了新紀(jì)元，也為臨床疾病的診、防、治提供了新的工具。制備單克隆抗體包括動(dòng)物免疫、細(xì)胞融合、選擇雜交瘤、檢測(cè)抗體、雜交瘤細(xì)胞的克隆化、凍存以及單克隆抗體的大量生產(chǎn)，要經(jīng)過幾個(gè)月的一系列實(shí)驗(yàn)步驟，下面按照制備單克隆抗體的流程順序，逐一介紹其實(shí)驗(yàn)方法。細(xì)胞融合前準(zhǔn)備細(xì)...
撰稿李恩善免疫血清的制備是一項(xiàng)常用的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。價(jià)、高特異性的免疫血清可作為免疫學(xué)診斷的試劑（如用于制備免疫標(biāo)記抗體等），也可供特異性免疫治療用。免疫血清的效價(jià)高低取決于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的免疫反應(yīng)性及抗原的免疫原性。如以免疫原性強(qiáng)的抗原刺激高應(yīng)答性的機(jī)體，常可獲得價(jià)的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫時(shí)，則需同時(shí)加用佐劑以增強(qiáng)抗原的免疫原性。免疫血清的特異性主要取決于免疫用抗原的純度。因此，如欲獲得高特異性的免疫血清，必須予先純化抗原。此外，抗原的劑量、免疫途徑及注射抗原的時(shí)間...
薄基底膜腎病Ⅳ型膠原α鏈分布的免疫組化研究張承英朱世樂章友康鄭欣鄂潔侯平薄基底膜腎病（TBMN）是以持續(xù)性鏡下血尿?yàn)橹饕憩F(xiàn)的一種遺傳性腎病，腎小球基底膜（GBM）彌漫性變薄為該病惟一重要的病理學(xué)特征。既往關(guān)于Alport綜合征（Alportsyndrome,AS），另外一種以持續(xù)性鏡下血尿,GBM變薄增厚、撕裂、分層為特征的遺傳性腎病，Ⅳ型膠原α鏈分布的免疫組化研究較多，眾多研究表明,AS患者腎小球基底膜Ⅳ型膠原α3、α4、α5鏈表達(dá)缺陷［1］,而關(guān)于薄基底膜腎病Ⅳ型膠原α...
趙彩彥劉金星王淑琴甄真周俊英采用ABS-ELISA法（藥盒由比利時(shí)Innogentics公司提供）和雙抗體夾心ELISA法（藥盒由法國Immunotech公司或軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院提供）對(duì)46例肝炎肝硬化進(jìn)行了血清和腹水中IL-6、IL-2、TNF-α的測(cè)定。與正常對(duì)照組比較，肝炎肝硬化患者血清和腹水IL-6、TNF-α水平明顯升高，IL-2水平明顯降低。合并自發(fā)性腹膜炎（SBP）患者血清IL-6、TNF-α水平為（33.19±12.31）ng/L,（11.73&pl...
隨著分子生物學(xué)、免疫學(xué)理論和技術(shù)的發(fā)展，運(yùn)用重組表達(dá)技術(shù)來生產(chǎn)預(yù)防和治療疾病的制品已成為近幾年研究的熱點(diǎn)。白細(xì)胞介素-2是一種具有廣泛生物學(xué)活性的細(xì)胞因子，它能夠有效地提高免疫功能，醫(yī)學(xué)上已用于預(yù)防和治療一些常規(guī)方法難以治療的疾病，如腫瘤等；在獸醫(yī)方面因其能提高疫苗的免疫效果，尤其是在基因工程亞單位苗的免疫效果而倍受重視，展現(xiàn)出廣闊的應(yīng)用前景。一、白細(xì)胞介素-2的受體及其生物學(xué)功能：白細(xì)胞介素-2（IL-2）是一種zui早發(fā)現(xiàn)的具有廣泛生物活性的細(xì)胞因子，在1979年第二屆淋...
經(jīng)過近20年的產(chǎn)前診斷經(jīng)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)染色體異常的胎兒檢出率并不理想，如羊水細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果只有2-3%，孕早期的絨毛細(xì)胞檢查發(fā)現(xiàn)異常率為7.5-10%左右。這說明原有高危人群的定義范圍還有待改進(jìn)。例如目前產(chǎn)前診斷適應(yīng)仍以高齡孕婦占絕大多數(shù)，國外為80-90%，國內(nèi)高齡者較少，但在產(chǎn)前診斷中也占1/3左右。而先天愚型兒中只有20%是由高齡孕婦所生。因此如何從普通人群中，特別是年紀(jì)小于35歲的人群中篩選出高危者的問題已經(jīng)引起許多學(xué)者的關(guān)注，并進(jìn)行了有關(guān)研究。近年來已有不少國家采用在孕中期...
ELISPOT斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫分析使細(xì)胞因子分泌過程更加形象。因?yàn)榧?xì)胞因子圍繞在細(xì)胞周圍，在被上清液稀釋之前，會(huì)和鄰近細(xì)胞表面的受體結(jié)合，或者降解。細(xì)胞因子和GranzemyBELISPOT實(shí)驗(yàn)是zui有效的體外監(jiān)控CD4或CD8T細(xì)胞抗原的方法。通過測(cè)定單個(gè)細(xì)胞因子信號(hào)及其頻率，可以建立具有不同集落大小的特殊T細(xì)胞庫。ELISPOT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞因子的*優(yōu)勢(shì)☆從1到10，000，000，可以測(cè)量體外細(xì)胞因子的分泌頻率，和ELISA以及四聚體染色、細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色相比，具有靈敏度...
ELISA檢測(cè)試劑盒操作說明書簡(jiǎn)介：丙酮酸激酶PK是糖酵解途徑的一個(gè)關(guān)鍵酶，目前研究表明，幾乎所有不同組織來源的腫瘤均伴有丙酮酸激酶的異構(gòu)重整體M2-PK的過度表達(dá),故稱為腫瘤型M2-PK（TumorM2-PK，TuM2-PK）。在正常細(xì)胞中，M2-PK主要以三聚體的形式存在，而在腫瘤細(xì)胞中，M2-PK大量表達(dá)并轉(zhuǎn)變?yōu)橹饕远垠w的形式存在。三聚體的M2-PK與磷酸烯醇丙酮酸PEP親和力很高，而二聚體的M2-PK與PEP的親和力則低的多，后者因此導(dǎo)致磷酸烯醇類物質(zhì)的堆積，這有...
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