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技術文章

Technical articles

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  • 20136-13
    免疫組化實驗的小竅門

    1.固定:用4%的多聚甲醛固定液。對于冰凍切片,甲醛固定有時比冰凍丙酮好;但對于不同的組織和抗原,可選用不同的固定液。有時候商品化的抗體會有比較適合而推薦的固定液,請于購置前注意說明書。BouinS固定液:飽和苦味酸750ml,甲醛250ml,冰醋酸50ml,其對組織的穿透力較強,固定較好,結構完整,但因偏酸,對抗原有一定損害,且組織收縮明顯,不適于組織標本的長期保存。PLP液:即高碘酸鈉-賴氨酸-多聚甲醛,適于固定石蠟切片。適于富含糖類組織,對超微結構及許多抗原的抗原性保存...

  • 20136-13
    酶聯方法的標本收集與實驗準備

    臨床檢驗常見的標本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些標本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。(一)臨床標本的收集A、血液標本有些生理因素,如吸煙、進食、運動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標本的采集應盡量避免生理因素干擾,以條件一致為宜,如無法避免,應在標本上注明該因素。1.外周血一般選取左手無名指內側采血,該部位應無凍瘡,炎癥,水腫,破損。如該部位不符合要求,以其他...

  • 20136-13
    ELISA 方法的實驗原理和操作過程.

    ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來,發展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學和醫學科學的許多領域。(一)原理ELISA是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除...

  • 20136-13
    動植物樣品的采集及DNA樣品的提取

    動物樣品的采集及處理方法遺傳學數據在野生動物和圈養動物的保護和管理中變得日益重要。在本文中,我們總結了一些能簡便而有效地獲得樣品及數據的方法。我們在采集樣品之前,對將要進行的遺傳學分析有所了解。然而,采集者并非都是研究者,當采集地與實驗室有相當距離時,采集者常常要保存好樣品直到有合適的接受者或存放地,這就要求采集者應具備一定的經驗。首先,所有樣品均應以個體序號進行標注,并且應寫上種名、性別、采樣者姓名以及采集日期,越詳盡越好,以便同一個體的不同類數據可以相互引用,另外,地理來...

  • 20136-13
    實驗室常用細胞目錄名詞大全

    3T3swissSwiss小鼠胚胎成纖維細胞A549人肺癌細胞(能產生Keratin)CHOdhfr二氫葉酸缺陷型中國倉鼠卵巢細胞CHO-K1中國倉鼠卵巢細胞Cyc-tAg小鼠T淋巴細胞瘤(SV40T抗原轉染)DU145人前列腺癌細胞FDC-P1小鼠正常骨髓細胞GH3大鼠垂體瘤細胞GT1.1人垂體瘤細胞(分泌促生長激素分泌激素)HEK-293人胚腎細胞Hela人宮頸癌細胞MC3T3-E1小鼠胚胎成骨細胞MCF7人乳腺癌細胞MDA-MB-231人乳腺癌細胞MDA-MB-435s...

  • 20136-13
    質粒提取簡介及問題分析

    一、導論質粒提取的原理:轉自復旦大學一位老師的帖子,后面是方法介紹堿裂解法從大腸桿菌制備質粒,是從事分子生物學研究的實驗室每天都要用的常規技術。可是我收研究生十幾年了,幾乎毫無例外的是我那些給人感覺什么都知道的學生卻對堿法質粒抽提的原理知之甚少。追其原因,我想大概是因為《分子克隆》里面只講實驗操作步驟,而沒有對原理進行詳細的論述。這是導致我的學生誤入歧途的主要原因。后來我發現其實是整個中國的相關領域的研究生水平都差不多,甚至有很多“老師”也是這個狀態。這就不得不讓人感到悲哀了...

  • 20136-13
    常用熒光染料的激發和發射波長

    FluorescentDye(熒光染料)Excitation(激發波長,nm)Emission(發射波長,nm)Cy2489506GFP(RedShifted)488507YO-PRO-1491509YOYO-1491509Calcein494517FITC494518FluorX494519Alexa488490520Rhodamine110496520ABI,5-FAM494522OregonGreen?500503522OregonGreen?488496524Rlbo...

  • 20136-13
    DEAE-Sephadex A-50柱層析純化免疫球蛋白

    (一)原理DEAE-SephadexA-50(二乙基氨基乙基-葡聚糖A-50)為弱堿性陰離子交換劑。用NaOH將CL-型轉變為OH-型后,可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白屬于中性蛋白(等電點為PH6.85~7.5),其余均屬酸性蛋白。在PH7.2~7.4的環境中,酸性蛋白均被DEAE-SephadexA-50吸附,只有γ球蛋白不被吸附。因此,通過柱層析γ球蛋白便可在洗脫中先流出,而其他蛋白則被吸附在柱上,從而便可分離獲得純化的IgG。DEAE-sephadexA-50柱層析是...

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