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技術文章

Technical articles

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  • 20136-13
    Western Blot 原理和操作方法

    WesternBlot工作原理蛋白質的電泳分離是重要的生物化學分離純化技術之一,電泳是指帶電粒子在電場作用下,向著與其電荷相反的電極移動的現象.根據所采用的支持物不同,有瓊脂糖凝膠電泳,淀粉凝膠電泳,聚丙烯酰胺凝膠電泳等.其中,聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)由于無電滲作用,樣品用量少(1-100μg),分辨率高,可檢出10-9-10-12mol的樣品,凝膠機械強度大,重復性好以及可以通過調節單體濃度或單體與交聯劑的比例而得到孔徑不同的凝膠等優點而受到廣泛的應用.SDS-PAG...

  • 20136-13
    熒光探針Fluo-3/AM和FuraRed測量單細胞中比率鈣

    熒光探針Fluo-3/AM和FuraRed測量單細胞中比率鈣中國醫學物理學雜志1999年第3期第16卷實驗研究作者:馬曉冬朱曉亮趙清張瑾張颯雷國華黃行許鮑永耀單位:馬曉冬趙清張瑾張颯雷國華黃行許鮑永耀(*軍醫大學中心實驗室);朱曉亮(南方醫院皮膚科,廣東廣州510515)關鍵詞:激光掃描共聚焦顯微鏡;Fluo-3/AM;FuraRed;比率鈣...摘要:應用ACAS570激光掃描共聚焦顯微鏡(laserscanningconfocalmicroscope,LSCM簡稱共焦顯微...

  • 20136-13
    激光掃描共焦顯微鏡原理及其應,細胞上的定位很漂亮

    激光掃描共焦顯微鏡(LSCM)是八十年代問世的一種新型分析儀器,由于其高分辨率,高靈敏度,高放大率等特點,在細胞水平上能作多種功能測量和分析,成為分析細胞學的重要研究工具,激光掃描共焦顯微鏡是在顯微鏡基礎上配置激光光源,掃描裝置,共軛聚焦裝置和檢測系統而形成的新型顯微鏡。它對活細胞分層掃描后得到光學切片,可進行細胞三維重建。測量分析細胞形態學參數和熒光強度。利用熒光探針標記LSCM可以對細胞內微細結構和離子的動態變化進行定性、定量、定時和定位分析。LSCM可以進行顯微手術,細...

  • 20136-13
    流式細胞儀測定血小板胞漿游離鈣濃度

    流式細胞儀測定血小板胞漿游離鈣濃度莊明明,溫奕欣,劉少列,洪曉鵬西安交通大學學報2005年10月第26卷第5期摘要:目的建立流式細胞儀測定血小板胞漿游離鈣離子濃度\[Ca2+\]i的方法。方法用Fluo3AM作為鈣指示劑,在有或無細胞外鈣\[Ca2+\]o存在的條件下,測定靜息和凝血酶激活狀態下人血小板胞漿游離鈣離子濃度\[Ca2+\]i的變化。結果Fluo3AM標記的血小板的平均熒光強度明顯增加。凝血酶使負載Fluo3AM標記的血小板胞漿\[Ca2+\]i明顯增加,且...

  • 20136-13
    如何選用特殊細胞系培養基?

    培養某一類型細胞沒有固定的培養條件。在MEM中培養的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之,MEM做粘附細胞培養"細胞培養、RPMI-1640做懸浮細胞培養"細胞培養是一個好的開始,各種目的無血清培養AIMV(12005)培養基(SFM)。L-谷氨酰胺在細胞培養中重要嗎?它在溶液中不穩定嗎?L-谷氨酰胺在細胞培養時是重要的。脫掉氨基后,L-谷氨酰胺可作為培養細胞的能量來源、參與蛋白質的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經過一段時間后會降解,但是確切的降解率一...

  • 20136-13
    影響ELISA試驗效果常見分析,和解決思路

    ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。我將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給同行帶來一些啟發,提高試驗質量。操作步驟可能原因解決辦法選擇試劑選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。加樣1.血清或血漿標本分離不好即進行加樣;2.手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是...

  • 20136-13
    ELISA的精點摘要,不要錯過奧

    的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國內醫學檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點,珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與特殊儀器配合應用,兩者均有詳細的使用說明,嚴格遵照規定操作,必能得出準確的結果。4.1標本的采取和保存可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標...

  • 20136-13
    免疫熒光制血樣品與視覺享受

    一、原理(一)什么是熒光,簡單地講,當用一定波長的光(如紫外光)照射某種物質時,經過照射的物質在極短時間內即可發射出一種可見的光,這種光即為熒光。在生物中,由于產生熒光的方式不同,可以概括地歸納為以下幾種:1.自發熒光:在生物的某些組織中,經紫外線照射后能直接發射出熒光的稱為自發熒光(或直接熒光)。如植物組織中的葉綠素,經紫外線照射后,即可發出紅色熒光。2.次生熒光:有些生物組織經紫外線照射后,并不能發出熒光,但是當它吸收熒光染料后也可以產生熒光,這種稱為次生熒光(或間接熒光...

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