技術文章
Technical articlesHypoxyprobe公司基于缺氧探針抗體技術,在此技術上開發了系列缺氧探針標記試劑盒,為組織疾病的診斷和治療提供有力研究工具。
檢測原理
低氧標志物測定是利用還原硝基有選擇性結合乏氧細胞的能力而形成的一種從細胞水平測定腫瘤乏氧的技術,其原理是:腫瘤乏氧細胞還原能力強,當具有電子親合力的硝基咪唑主動擴散透過細胞脂膜,在細胞內硝基還原酶作用下,硝基被還原,還原產物與大分子物質不可逆結合,滯留在組織內。而正常含氧細胞親電子硝基咪唑還原產物立即被氧化,從而用硝基咪唑類化合物在腫瘤內的代謝程度來反映腫瘤的乏氧。
Pimonidazole是新型的乏氧細胞標記物,HPI公司擁有硝基咪唑類化合物特異性抗體,該抗體為公司技術,可用于免疫組織化學、酶聯免疫吸附試驗和流式細胞分析檢測。
常見問題解答(FAO):
※ Hypoxyprobe-1 探針如何溶解?
Pimonidazole HCl 是弱堿性鹽酸鹽,水溶性非常好,建議溶解于116mg/ml 的中性生理鹽水。
※ Pimonidazole HCl免疫劑量是多少?
對于常規的小動物大小比較均一的,例如:小鼠或大鼠,我們推薦:探針用量:60 mg/kg。從30 mg/kg 到 400 mg/kg在小鼠和大鼠都有用到,在此范圍內的探針用量,不會由于血流效應而導致毒性或氧量的改變。對于體型較大個體,注射劑量依據個體的基礎表面積而定。對于人樣本,推薦劑量為:0.5 mg/m2,狗樣本:0.28 mg/m2
※ Pimonidazole HCl 探針是否能夠滲透進入低氧大腦組織或腦腫瘤組織?
Pimonidazole HCl可以自由滲透進入腦和腦腫瘤組織。
※ 探針注射后,多久可以進行收獲組織?
對于人體組織的一些研究表明,收獲組織需要在免疫后15-24小時后檢查。探針在血漿中的半衰期是5小時,因此16-24小時相當于3-5個探針半衰期循環。也就是說:在組織檢查時:大概有1/8 到1/32 的探針仍存在,冷固定后,這樣減少了非特異性染色,且低背景。
另外關于人類腫瘤研究表明,活組織檢查應該在免疫后,1.5-4小時,然后組織及時轉到液氮固定。這種方法背景也較低。小鼠血漿中的探針半衰期在0.25小時。這種情況下,采取1-2小時收獲組織然后采取快速固定方法,可有效的消除背景。
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Hypoxyprobe Plus Kit | HP2-200Kit |
Hypoxyprobe Plus Kit | HP2-1000Kit |
Hypoxyprobe Omni Kit | HP3-100Kit |
Hypoxyprobe Omni Kit | HP3-200Kit |
Hypoxyprobe Omni Kit | HP3-1000Kit |
Hypoxyprobe Green Kit | HP6-100Kit |
Hypoxyprobe Green Kit | HP6-200Kit |
Hypoxyprobe Green Kit | HP6-1000Kit |
Hypoxyprobe RedAPC Kit | HP8-100Kit |
Hypoxyprobe RedAPC Kit | HP8-200Kit |
Hypoxyprobe RedAPC Kit | HP8-1000Kit |